在做病毒包装实验中，有科研工作者常见到：用相同一个病毒载体平台进行病毒包装实验，为什么有人做的很高，次次顺利。有人却是经常做不起来，稳定性很差，不是滴度低就是根本不出毒?
腺病毒or慢病毒？
慢病毒可以插入细胞基因组，稳定表达，持续时间长。包装周期短（通常要两个月），感染效率相对于腺病毒要低太多。不能扩增腺病毒包装技术，一次包装的病毒用完后即使再必须只能再次包装腺病毒包装技术，成本高。一次包装所受到的的病毒滴度也相对较低（10的8次方pfu/ml），不大合适直接用于动物实验。
腺病毒传染效率高，很多细胞都能超过近99%。纯化后的腺病毒可以直接进行植物活体注射。可以在体外扩增，每次使用完后，可以自己用包装细胞进行扩增，节约费用。一次包装所受到的滴度较高（纯化后为10的11次方pfu/ml，未纯化的为10的10次方pfu/ml）。不整合到基因组，无法稳定表达。
表达时间相对于慢病毒较短（两三周这样）。包装腺病毒的周期会比慢病毒长一些（通常要两个三天），因为腺病毒包装过程相对较繁琐。
总体来说，对于这些实验来说，选择腺病毒优势更大，并且这些状况下腺病毒是可以代替慢病毒来进行试验。
病毒包装的关键点
病毒包装的几个关键节点就是细胞因素、载体平台（尽量使用成熟的商业化载体平台）、构建重组的底物正确与否、质粒抽提纯化情况、包装转染控制（24、48小时的细胞及荧光状态判定）、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列状况、蛋白功能毒性等就会妨碍到能否能包装成功）。
如何改善病毒感染效率
病毒感染效率主要和三方面有关，病毒原本的效价，目的细胞类型或者个人操作问题。在此处我先把操作问题排除，你才能提升病毒感染效率，可以先提升细菌滴度，在传染的过程中适当的加强病毒感染量以及借助多次加入病毒强化感染率。其次，你也可以加一些辅助感染试剂来提升细菌感染率的，如。另外，你要按照不同的目的细胞加入适合的病毒量，这样就能更准确的提升病毒感染效率。
293T细胞有关
293T细胞长的非常快，传代时也容易从壁上断裂，不应该如何吹打，保险起见，在消化时而是要尽量吹打均匀。此外传代时吹打的细胞液，每个平皿里的细胞也要铺的均匀，并要尽快换液传代。
293T细胞包装慢病毒时，转染方法优先选用阳离子脂质体步骤。氯化钙法转染效率相对低，出毒效率相对低。且对氯化钙法对pH值规定很严格，差一点都不行。阳离子脂质体法效果非常好，但常规使用的细胞毒性大，有钱的可以使用低毒性的HD，钱少的可以选择其它公司的阳离子脂质体产品，效率和差不多，毒性基本没有。
病毒浓缩有关
病毒通常可以收两次，可以在48h和72h各收一次。如果你不想麻烦浓缩病毒的话，也可以不浓缩，直接将收集的病毒上清成为要感染的细胞的培养基，但是也许效果会不太好。并且通常收病毒时，培养基的营养已经消耗了这些，那样直接培养感染细胞会损伤细胞，所以建议还是进行浓缩后再感染。
如何增加腺病毒的活性？
提高腺病毒的活性，关键应该是在病毒包装过程和测序过程。纯化过程也是去除有弊端的细菌和细胞碎片等易于导致人体免疫反应的过程，如果扩增的细菌滴度高，那么纯化后才会更高的。
纯化后病毒怎么保存？
纯化后的病毒用无血清的DMEM保存就可以了，一般放到-80度进行持久保存。如果收集的上清不想立刻纯化可先放在-80度，等以后收集的一起纯化。目的蛋白在包装细胞中以及抗体检测细胞中会表达的，滴度测定就是按照目的蛋白表达状况来进行操作的。
