腺病毒包装纯化服务腺病毒非整合型双链DNA病毒的临床应用

   发布日期:2022-05-14 20:19:34     来源:网络整理    作者:佚名    浏览:170    评论:0    
核心提示:腺病毒(,AdV)是一种非整合型双链DNA病毒,在自然界中广泛分布。的统计,截至2006年,在全球1192项基因治疗临床试验方案中,有305项(26%)使用腺病毒载体,首次超过反转录病毒,居第一位。针对这一缺憾,我们在、AdMax等腺病毒系统的基础上,经过不断的改进与优化,建立了一套成熟的腺病毒包装系统,已解决各类科研用户的不同需求。

产品说明:

腺病毒包装纯化服务

腺病毒(,AdV)是一种非融合型双链DNA病毒,在自然界中广泛分布。虽然一些种类的腺病毒会导致人口腔道、上呼吸道或面部上皮细胞的急性传染;然而应用于遗传诊断研究的腺病毒是安全的,对人无致病、致畸、致癌的潜在伤害。无包膜的腺病毒颗粒体积为70~90nm,呈二十面体对称,由252个长度为8~10nm的壳粒排列组成。每个颗粒包括一个36000bp的线状双链DNA分子,两端各有长约100~600bp的逆向末端重复序列。根据ofGene的统计,截至2006年,在中国1192项基因诊断临床实验方案中,有305项(26%)使用腺病毒载体,首次达到反转录病毒,居第一位。由于腺病毒可以传染呼吸道和消化道,所以它所介导的基因诊断可以静脉注射,还可以通过服用经肾脏吸收,或借助喷雾、滴注经呼吸道吸收,使得基因诊断方案容易推广应用。

腺病毒进而表征、纯化和浓缩,且细菌滴度可高达/ml,比反转录病毒高出100000倍以上。所以,它介导的基因治疗常运用invivo的方法进行,是现在基因诊断临床实验中应用最多的一种载体。

腺病毒载体有以下特点:

(1)研究背景相当清楚;

(2)与人类基因组同源;

(3)才能同时表达多个基因;

(4)无需辅助病毒,可容纳几kb到几十kb的外源DNA;

(5)宿主范围广,转染率较高,在凋亡和非增殖期细胞中均能感染并表达基因;

(6)不整合到靶细胞基因组中,无插入致突变性,无致病性,对人无致病、致畸、致癌的潜在伤害;

(7)进而扩增和制备,可获得效价高(超过/ml)、稳定性好、基因转移效率高的病毒;

(8)可在肠道、呼吸道中繁殖腺病毒包装技术,具有口服活疫苗的发展前景;

(9)很容易进行临床应用规模的商业化生产,其病毒存放及运送条件均非常知道。

腺病毒载体的特点主要是运输的基因不能大幅表达,通常只表达5-20天,以及易造成局部组织增生反应和人体免疫反应。针对这一缺陷,我们在、AdMax等腺病毒系统的基础上,经过不断的改进与优化,建立了一套成熟的腺病毒包装系统,已解决各种科研用户的不同意愿。该平台是以复制缺陷型腺病毒DNA为骨架构建立的重组腺病毒系统,在穿梭载体、病毒骨架载体及包装细胞系等方面有巨大优势:出毒快捷、滴度高、包装可靠!我们可以按照用户的应该,在重组腺病毒载体中加入各类报告基因(GFP、RFP等)或标签(FLAG、HA、His等),纯化后的病毒抗体可以超过1×108-1×/ml,可以满足细胞水平研究所需病毒量和满足瘤内注射必须量不同规格病毒。

我们提供的服务包含:过表达腺病毒构建与包装,RNA干扰腺病毒构建与包装腺病毒包装技术,miRNA过表达腺病毒构建与包装,miRNA封闭腺病毒构建与包装。

我公司AdMax腺病毒包装系统是FrankL.教授成立的,由加拿大公司销售。将携带外源遗传的腺病毒穿梭质粒与携带了腺病毒大部分遗传组的辅助包装质粒共转染细胞,利用Cre/loxP(或FLP/frt)重组酶系统的作用推动重组,产生重组腺病毒。

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